细胞冻存的整个流程,比较复杂,一般分为准备工作、实际操作、冻成后观察。但不同的细胞冻存方法会存在一定差异,需要咨询专业医生。
细胞冻存的主要目的是将细胞放在低温环境下进行保存,减少细胞的代谢,以便后期进行使用,是目前比较常用的一种保护方式。
在进行冻存前需要更换新的培养基,使细胞一直处于对数生长期,轻微晃动,使液体融化。
然后将混合液置于4℃左右的冰箱,放置大概半个小时到一个小时。然后再转换到零下20℃的冰箱,放置两个小时左右,再转换到零下80℃的冰箱,最后直接放置到–196℃的液氮容器中。
在冻成一段时间后,取出一管进行复苏,观察检测细胞的存活率,然后再继续冻存。
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